《药理学（护专）实践》课程实践考核大纲

一、课程基本信息

专业名称/代码	护理（专科）/520201
课程名称/课程代码	药理学（护专）实践/13194
课程类别	公共基础课（ √  ）     专业核心课（    ）
实践考核单位	厦门医学院

二、实践考核目标

1.以药理学实验的基本知识、技术和方法为基础，结合不同作用类别的药物，使学生掌握药理学实验的基本知识，掌握药理学实验的基本技能，验证药理学中的基本理论，牢固掌握药理学的基本概念；了解在药物发现和评价过程中，药理学研究的内容和必要性。

2.通过药理学实验，使学生了解获得药理学知识的科学途径，同时培养学生实践操作、互助协作、独立思考、综合分析和解决问题能力。

三、实践考核内容

实践项目1 不同剂量对药物作用的影响

（一）实践考核目的

1.比较同一药物不同剂量下药物作用的差异。

2.验证中枢抑制药中枢神经系统的抑制作用。

3.掌握小鼠的基本实验操作，包括捉持、随机分组、称重、标记、腹腔注射、处死等。

4.熟悉常用手术器械手术剪和眼科镊的正确使用。

（二）主要仪器或标本

1.实验动物：小鼠，体重18-22g，雄性，实验前隔夜禁食不禁水约8h。

2.受试药：中枢抑制药——苯巴比妥钠(规格:0.1g）和水合氯醛，用生理盐水(NS.）配制或稀释。

3.实验试剂：5%苦味酸、生理盐水、蒸馏水、75%乙醇。

4.实验器材：托盘、注射器（1ml）、标签纸、手术器械、小鼠笼1个、大烧杯或小鼠笼5个（动物观察用)、电子天平、中烧杯（动物称重用）、油性红色记号笔、棉签1支（蘸取苦味酸用）、量程(10-5000ul)的移液器和移液器架、移液器配套吸头、EP管、标签纸、试管架、棉球、擦手纸、10ml量筒、离心管、涡旋仪、废液缸。

5.其他物品：科学计算器、碘伏、一次性口罩和乳胶手套。

（三）实践方法（或步骤）

1.配液：以下溶液都用生理盐水配制。

1) 三个浓度的水合氯醛溶液，各1ml。

2) 三个浓度的苯巴比妥钠溶液，各1ml。

2.小鼠随机分组（n=12）、编号、称重、给药

3.腹腔注射 (ip.)不同剂量的中枢抑制药水合氯醛对小鼠的催眠作用

4.腹腔注射 (ip.)不同剂量的中枢抑制药苯巴比妥钠对小鼠的催眠作用

从高剂量开始给药，给药后即刻记时，将小鼠放入烧杯或鼠笼中进行笼边观察，记录小鼠从给药到开始出现翻正反射消失的时间（即药物作用的潜伏期），并继续观察并计时，直至翻正反射恢复。若个别动物因药物过量致死，请注明并记录死亡时间。

小鼠催眠作用的主要指标：翻正反射的消失。

【观察时间】酌情为30-60min

以翻正反射消失与恢复的时间，计算：

①药物作用的潜伏期(min)=翻正反射消失时间-给药时间

②药物作用的持续期(min)=翻正反射恢复时间-翻正反射消失时间

(若30min后翻正反射仍未恢复，受课堂时间所限，不再继续观察,持续期用>30min表示)

实践项目2 不同给药途径对药物作用的影响

（一）实践考核目的

1.比较同一药物不同给药途径下药物作用的差异 (药物作用的快慢、药物作用的性质)。

2.验证中枢兴奋药对中枢神经系统的兴奋作用。

3.验证硫酸镁在不同给药途径下（口服及腹腔注射）的不同作用。

4.掌握小鼠的基本实验操作，包括捉持、随机分组、称重、标记、各种途径的给药方法（腹腔注射、灌胃、皮下注射、肌肉注射、尾静脉注射等）、尸体解剖和大体肉眼观察、处死等。

5.熟悉常用手术器械手术剪和眼科镊的正确使用。

（二）主要仪器或标本

1.实验动物：小鼠，体重18-22g，雄性，实验前隔夜禁食不禁水约8h。

2.受试药：①中枢兴奋药，可选尼可刹米注射液(规格:0.375g,1.5ml)；②硫酸镁。均用生理盐水(NS.）配制或稀释。

3.实验试剂：5%苦味酸、生理盐水、蒸馏水、75%乙醇。

4.实验器材：托盘、注射器（1ml，2ml备用）、标签纸、小鼠灌胃针头、手术器械、蛙板及固定钉4个、小鼠笼1个、大烧杯5个（动物观察用，不够则用小鼠笼替代)、电子天平、中烧杯（动物称重用）、油性红色记号笔、棉签1支（蘸取苦味酸用）、量程(10-5000ul)的移液器和移液器架、移液器配套吸头、EP管、标签纸、试管架、棉球、擦手纸、10ml量筒、离心管、涡旋仪、废液缸。

5.其他物品：其他物品：科学计算器、碘伏、一次性口罩和乳胶手套。

（三）实践方法（或步骤）

1. 配液：以下溶液都用生理盐水配制。

1) 3.25%的尼可刹米溶液，5ml。

2) 5%和10%的硫酸镁溶液，各2ml。

2.小鼠随机分组（n=18）、编号、称重、给药

3.不同给药途径的中枢兴奋药尼可刹米对小鼠的惊厥作用

给药后即刻计时，将小鼠放入烧杯或鼠笼中进行笼边观察，记录小鼠从给药到开始出现惊厥先兆的时间（即药物作用的潜伏期）。），若动物有从兴奋状态恢复正常（超过1分钟），记录恢复时间。若有个别动物因药物过量致死，请注明并记录死亡时间。

观察的主要指标为中枢兴奋作用——惊厥反应。观察时间不少于30min。计算：①药物作用的潜伏期(min)=惊厥先兆发生时间-给药时间；②药物作用的持续期(min)=兴奋状态结束时间-惊厥先兆发生时间。

2.不同给药途径的硫酸镁对小鼠作用性质的影响，0.1ml/10g ,n=2/组。

给药后即刻计时，将小鼠放入烧杯或鼠笼中进行笼边观察。给药后死亡的小鼠，及给药后20-30分钟后所有存活小鼠都予以处死，然后进行尸解、大体肉眼观察并记录；对小鼠情况进行比较。

提示：1）全身作用:体态、活动性、骨骼肌张力、呼吸(频率、深浅度)、翻正反射(存在/消失)……2）局部作用(即肠道作用):排便情况、肠蠕动情况、肠膨胀程度、粪便容量及性状……

实践项目3 绘制水杨酸钠标准曲线

（一）实践考核目的

1.掌握标准曲线的绘制方法

2.掌握测定药物浓度的一种方法——比色法

3.掌握配制药物的倍比稀释法。

（二）主要仪器或标本

1.受试药：10%水杨酸钠溶液（用生理盐水配制）。

3.实验试剂：10%三氯醋酸(TCA)、10%三氯化铁、生理盐水、蒸馏水。

4.实验器材：10mL量筒及吸管(量取7mLTCA用)、污物缸、试管架、EP管、离心管、量程(10-5000uL)的移液器和移液器架、移液器配套吸头、漩涡混合器、面巾纸、棉签、棉球、纱布、标签纸、离心机、配平用托盘天平及小烧杯两个、滴管、723分光光度计、石英或玻璃比色皿、擦镜纸、洗瓶。

5.其他物品(自备)：科学计算器、U盘、碘伏一瓶、一次性口罩和乳胶手套。

（三）实践方法（或步骤）

1. 配液：精确配置0.5%、0.25%、0.125%、0.05%，和0.005%五个浓度的水杨酸钠标准液。

2.按顺序配置6个待测样品

标准管号	0(调零管)	1	2	3	4	5
TCA	7ml	7ml	7ml	7ml	7ml	7ml
蒸馏水	2ml	/	/	/	/	/
水杨酸钠	/	0.5%,2ml	0.25%,2ml	0.125%,2ml	0.05%,2ml	0.005%,2ml
混匀
取液	6ml	6ml	6ml	6ml	6ml	6ml
FeCl3	0.6ml	0.6ml	0.6ml	0.6ml	0.6ml	0.6ml
摇匀显色

3.以调零管为对照管，依次从浓度由低到高以比色法测定OD

标准管号	0(调零管)	1	2	3	4	5
OD值（520nm）	/

4. 在电脑上绘制出水杨酸钠标准曲线

实践项目4 家兔水杨酸钠血药浓度及半衰期的测定

（一）实践考核目的

1.掌握测定血药浓度的一种方法——比色法

2.掌握两种药-时曲线的绘制，即：①C-t曲线；②lgC-t曲线

3.能够利用lgC-t药-时曲线计算t1/2

4.掌握家兔的基本实验操作，包括捉持、固定、麻醉、耳缘静脉给药、颈总动脉插管和采血、处死等。

5.掌握手术器械的正确使用，包括手术刀的正确装卸、器械打结（外科结）、组织钝性分离等。

（二）主要仪器或标本

1.实验对象：家兔（2-3kg），雌雄不拘，实验前禁食不禁水12小时。

2.受试药：10%水杨酸钠溶液（用生理盐水配制）。

3.实验试剂：20%乌拉坦、利多卡因注射液(5mL,0.1g)、10%三氯醋酸(TCA)、10%三氯化铁、肝素(2mL:12500U)、生理盐水、蒸馏水、75%乙醇。

4.实验器材：手术灯、兔固定箱、兔手术台、标签纸、10mL量筒及吸管(量取7mLTCA用)、注射器、头皮针、污物缸、手术器械一套、细丝线、动脉夹、动脉插管、试管架、EP管、离心管、婴儿秤、量程(10-5000uL)的移液器和移液器架、移液器配套吸头、漩涡混合器、面巾纸、棉签、棉球、纱布、标签纸、绑绳、离心机、配平用托盘天平及小烧杯两个、滴管、723分光光度计、石英或玻璃比色皿、擦镜纸、洗瓶。

5.其他物品(自备)：科学计算器、U盘、碘伏一瓶、一次性口罩和乳胶手套。

（三）实践方法（或步骤）

1. 动物麻醉：家兔抓拿、称重、全身麻醉(20%乌拉坦），将其固定于手术台。

2.作采血准备：颈部备皮、切开皮肤、钝性分离一侧颈总动脉并作动脉插管以备采血之用（动脉导管预注肝素）。操作前应预先对采血管(EP管)进行肝素化处理。

3.给予受试药：10%水杨酸钠溶液(2ml/kg)，通过耳缘静脉或颈静脉快速给药，给药即刻开始记时。

4.采集血样：采血后应及时处理血样

（1）取肝素化采血管6支，并标记0-5号

（2）分别于给药前和给药后五个时间点（3、5、15、25、40min）采集不少于2ml的血液，分别置于0-5号的肝素化采血管中，然后及时取出2ml置于离心管中与TCA在涡旋仪上充分混匀备用。

5.比色法测定不同时间点血样的OD值，并通过标准曲线计算各时间点水杨酸钠的血药浓度

管号	0	1	2	3	4	5
采血时间（min）	给药前
TCA	7ml	7ml	7ml	7ml	7ml	7ml
血	2ml	2ml	2ml	2ml	2ml	2ml
应立即用漩涡混合器充分混匀，避免形成血块，影响药物提取↓ 离心（2000转/min，5 min）
上清液	6 ml	6 ml	6 ml	6 ml	6 ml	6 ml
10%FeCl3	0.6 ml	0.6 ml	0.6 ml	0.6 ml	0.6 ml	0.6 ml
摇匀显色，以“给药前”为对照管，按颜色由浅到深测OD值
OD值	0

以“给药前”为对照管进行调零比色。取离心管6支，并标记0-5号

6.依据水杨酸钠标准曲线计算水杨酸钠血药浓度，制作药时曲线：①C-t曲线；②lgC-t散点图

7.根据lgC-t散点图，初步判断房室数，然后拟合lgC-t曲线

8.利用lgC-t曲线，计算药动学参数t1/2        

实践项目5 传出神经系统药物对家兔血压的影响

（一）实践考核目的

1.观察及验证肾上腺素受体激动药及阻滞药对家兔血压的影响，包括量效关系、受体拮抗药对受体激动药的拮抗作用等。

2.掌握家兔的基本实验操作，包括捉持、固定、麻醉、耳缘静脉给药、颈总动脉插管及动脉血压的测定、处死等。

3.掌握手术器械的正确使用，包括手术刀的正确装卸、器械打结（外科结）、组织钝性分离等。

（二）主要仪器或标本

1.实验对象：家兔（2-3kg），雌雄不拘，实验前禁食不禁水12小时。

2.受试药：肾上腺素受体激动药和阻断药。

3.实验试剂：20%乌拉坦（NS.配制）、利多卡因注射液(5mL,0.1g,备用)、肝素生理盐水（62.5u/mL）、生理盐水、蒸馏水、75%乙醇。

4.实验器材：婴儿秤、棉球、纱布、标签纸、手术灯、计算机（BL-420N生物信号采集与分析系统）、保护电极、生物血压传感器（血压换能器）、三通管、双凹夹、三角架、兔固定箱、兔手术台、绑绳、注射器、污物缸、手术器械一套、细纱线、动脉夹、动脉插管（连血压换能器）、静脉插管（备用)、头皮针。

5.其他物品：碘伏一瓶（备用）、一次性口罩和乳胶手套若干(自备) 、科学计算器(自备)、U盘（自备）。

（三）实践方法（或步骤）

1.仪器连接：连接动脉导管、三通开关与血压换能器。

2.家兔抓拿、称重、麻醉及固定，行颈部手术、行颈总动脉插管，并与血压换能器相连，在生物信号记录系统获得最佳血压曲线。

3.行颈外静脉插管（给药备用）

4.观察和记录正常及给药后血压的变化：

①观察和记录一段正常血压曲线，作给药前正常对照。

②经静脉依次给予传出神经系统药物，观察并记录血压变化情况。

a.肾上腺素受体激动药对血压的作用及a受体阻断药对其血压作用的影响。

b.肾上腺素受体激动药对血压的作用及b受体阻断药对其血压作用的影响。